Isolation, production, and characterization of an extracellular lipase from Trichoderma harzianum isolated from soil

Abstract

Bu çalışma, Trichoderma harzianum lipazının karakterizasyonu hakkında ilk rapordur. Yeni bir suş olan Trichoderma harzianum IDM14D topraktan izole edildi. İzole edilen bu suş, lipaz üretimi için çalkalamalı kültürde 30 °C’de 7 gün inkübe edilmiştir. Lipaz üretimi için en iyi karbon kaynağı glukoz, en iyi azot kaynağının pepton olduğu belirlendi. Maksimum biyokütle üretimi 7 gün sonunda 1,25 g/L olarak belirlendi. Enzimin en iyi aktivite gösterdiği pH 8,5, sıcaklık 40 °C olarak belirlendi. T. harzianum lipazı pH 8,0-10,0 aralığında 40 °C’de 60 dakika kararlılığını koruduğu belirlendi. Ca2+ ve Mn2+ iyonlarının lipaz aktivitesini artırdığı, fakat diğer metal iyonlarının enzim aktivitesini etkilemediği gözlendi. p-nitrofenil butirat hidrolizi ile ölçülen ham enzimin Km ve Vmaks değerleri sırasıyla 7,15 mM ve 7,067 mM/dk olarak belirlendi.

This is the first report about the characterization of Trichoderma harzianum lipase. A novel strain of Trichoderma harzianum IDM14D was isolated from soil. The isolated strain was cultivated for lipase production in shake fl asks at 30 ºC for 7 days. For lipase production, it was determined that the best carbon source was glucose and the best nitrogen source was peptone. Maximum biomass was produced at a concentration of 1.25 g/L, in 7 days. The optimum pH and temperature for activity of the enzyme were 8.5 and 40 ºC, respectively. The lipase was stable at a pH range of 8.0-10.0 and at 40 ºC for 60 min. Ca2+ and Mn2+ enhanced lipase activity but it was determined that other metallic ions did not affect the enzyme activity. The Km and Vmax values of the crude enzyme for p-nitrophenyl butyrate hydrolysis were found to be 7.15 mM and 7.067 mM/min, respectively.